El objetivo de esta práctica es realizar la prueba de aglutinación en sangre fresca para realizar el análisis de tipos sanguíneos, haciendo una observación macroscópica de la aglutinación.
Introducción
Vamos a hacer una prueba aglutinación en sangre fresca, utilizando el tubo con tapón morado que contiene anticoagulante, tipificadores anti- A, anti- B y anti-D color amarillo, azul y transparente respectivamente, punteando la sangre sobre la placa excavada.
Marco teorico
1.-Se tomara la muestra de sangre y se colocara en el tubo de ensaye con tapón morado y anticoagulante. Se puntea en la placa excavada con la pipeta Pasteur y se le colocaran los tipificadores anti-A, anti-B y anti-D
2.- Se mezclara la sangre con el tipificador, utilizando los palillos de madera, después se harán movimientos en rotación y traslación para observar la aglutinación y darna cuenta si la sangre es tipo positivo o negativo.
3.-Una vez terminado deberemos limpiar las pipetas para que la sangre no se pegue, ya que si lo hace deberemos tirarla. Nos desharemos de los materiales de acuerdo a la Nom-087
Esta práctica tiene como objetivo que el alumno de laboratorio de análisis clínicos aprenda a realizar una prueba de aglutinación en suero sanguíneo, utilizando los instrumentos de laboratorio, equipo científico y reactivo para alcanzar su objetivo en la elaboración de un examen clínico denominado reacciones febriles, dando la oportunidad de investigar microorganismos bacteriológicos.
*Introducción
En esta practica se llevara a cabo la técnica de venopuncion para la extracción de la sangre fresca, donde se obtendrá por medio de centrifuga la separación de paquete sanguíneo y suero plasmático.
En esta práctica se debe de aplicar el tema de serológica, ya que ocuparemos los tificos H, O, y paratíficos A, B, Brucella Abortus y Proteus OX19.
Esta prueba es exclusivamente de aglutinación por lo que se debe observar a tras luz en forma macroscópica y en el microscopio, en el objetivo 10x de forma microscópica.
*Materiales
1.- Lamina de cristal para reacciones febriles.
2.- Tubo de ensaye tapón rojo
3.- Palitos de madera
4.- Torundas de algodón secas
5.- Torundas alcoholizadas
6.- Centrifuga
7.- Microscopio
8.- Reactivos febriclin
9.- Jeringa hipodérmica desechable
10.- Torniquete
11.- Masking tape
12.- Pipeta Pasteur
13.- Bulbo
*Marco Teórico
1.-La apertura de la práctica fue con la obtención de la toma de muestra, la cual costo un poco de trabajo puesto que es la primera vez que de obtiene sangre fresca obtenida por nosotros mismos.
2.-Ya obtenida la sangre fresca de los dos pacientes es introducida a los tubos de ensaye correspondientes, los cuales son etiquetados con los datos del paciente.
3.-La sangre se deja coagular y es introducida a la centrifuga para que a través de ella se obtenga la separación de paquete sanguíneo y suero plasmático.
4.- Ya separados el suero plasmático del paquete sanguíneo, el suero plasmático se pipetea a través de la pipeta Pasteur con bulbo y es punteado en la laminilla de cristal trasparente, así igual con el otro suero obtenido de la segunda toma de muestra.
5.- Ya punteada la laminilla de cristal, se le agrega una gota de febriclin tifico H, O y paratifico A, B, Brucella Abourtus y Proteus 0X19 de la siguiente manera.
6.- Ya realizado este procedimiento, con palillos de madera se mezcla el suero plasmático con los reactivos, claro esta, sin ser reutilizados los palillos.
7.- De igual manera se realiza una maniobra agitando la laminilla de cristal de un lado a otro y se observa macroscópicamente a tras luz.
8.- El resultado a tras luz fue homogéneo pero para tener un resultado mas seguro se realiza la observación microscópica
9.- La laminilla de cristal se coloca en la platina del microscopio y es observada en el objetivo 10x
10.- El resultado de esta prueba fue negativo, puesto que no se registro macroscópicamente y microscópicamente nada fuera de lo normal.
11.- La observación microscópica de igual modo que la macroscópica fue homogénea.
Estas practicas tienen como objetivo aplicar la tincion de gram y observar microscopicamente los resultados obtenidos a través de todos los procedimientos antes seguidos
Introducción
Se debe realizar una tincion de gram en el frotis preparado anteriormente para poder llegar a la observacion microscopica de los microorganismos denominados bacterias, cabe mencionar que en este elemento de observacion no podríamos llegar a señalar microscopicamente los espirales
*Materiales 1.- Tincion de Gram 2.- Porta Objetos con frotis 3.- Torundas de algodón 4.- Papel secante 5.- Dos mecheros de bunsen 6.- Aceite de inmercion 7.- Microscopio 8.- Asa de platino 9.- Gas LP 10.- Vaso de pp. con 25 ml de agua destilada
Desarrollo
1.- Se preparo campo de esterilizacion y fueron entregados los porta objetos con el frotis, enseguida la mesa completa iba, y de 3 en 3, los frotis eran introducidos al mismo tiempo, y por un minuto en el frasco de cristal violeta
2.- Al pasar el minuto, estos se introducen de nuevo juntos, y por un minuto al frasco del lugol
3.- De nuevo al pasar el minuto, estos se introduciran en el frasco de alcohol con un procedimiento de entrada y salida, hasta lograr que ya no se escurriese el cristal violeta. 4.- Al lograr que ya no se escurriese el cristal violeta se enjuagaba con agua y se introducian de nuevo los tres al frasco de fucsina 5.- Ya listo este procedimiento se volvia a enjuagar y se dejan secar al aire seco 6.- Ya secos, se les agrega la gora del aceite de inemercion, la cual se dispersaba y esto permitia pasar al siguiente paso, el cual es la observacion microscopica. 7.- La observacion microscopica se realizaba en el 100x para poder lograr una mejor observacion.
en la observacion de los diferentes frotis se podia apreciar como manches en forma redonda de color morado o rojo, y en otros se observaban como pequeños bastones de color morado.
